危害在线检测生物反应器交仓分批培养的环境要素概述

塑造主要参数会影响到CHO细胞增殖、重组蛋白表述、蛋白质糖基化、体细胞类化合物和外在因素。在线检测生物反应器设计方案用以在CHO细胞内塑造用以RTP制造的悬浮培养物。体细胞根据CO2震荡选矿摇床、摇瓶、滚瓶增加后，注射在反应器内进行传代培养生长发育。针对交仓分批培养，反应器里的塑造环境监控系统一般根据实验设计方案(DoE)或一次单因素(OFAT)科学研究进行改善，这种提升包含环境温度、溶氧(DO)、渗透浓度和pH值等。
1.塑造环境温度
塑造减温一般在指数值成长期开展。为了降低细胞坏死和推动抗原生成，将塑造环境温度从37℃转换到29℃至35℃的比较低环境温度。超低温对详细细胞密度、细胞活性和细胞比生产主力具备积极作用。例如：应用交仓分批培养全过程塑造表达人促红细胞生成素(hEPO)的CHO体细胞时，超低温不仅有利于提升CHO细胞表达重组蛋白比生产主力，并且明显增强了编号未伸缩蛋白质反映非特异基因表达激话因子遗传基因，减少了蛋白降解的概率；超低温还通过调整细胞周期来提升hEPO的表述.
细胞培养基环境温度可以影响CHO体细胞里的VCD蛋白质表述。当表述抗CD20mAb的CHO体细胞在35°C、33°C和31°C下塑造并于第3、6和9天加上交仓培养液时，35°C能增加细胞密度及抗-CD20单克隆抗体。生产制造之中会用根据超低温标准上涨与抑止细胞坏死、促进细胞生长发育CHO细胞内miRNA表述的方法去提升IgG的形成。因而，超低温是细胞培养基正常的的因素之一。
2.渗透浓度
在交仓分批培养的塑造中后期，营养摄入和代谢副产品积淀可以增加细胞外渗透浓度。补充维生素和碱都能够提升塑造环境中的渗透浓度。在交仓分次环节中，NaCl维持高渗透浓度。它增强了mAb的滴度，降低了半乳糖基化，并提高了高甘露糖糖基化比例。连续培养造成净重克分子渗透浓度浓度值小于450mOsm/kg可以将高甘露糖糖基化下降到小于5%，并把单克隆抗体总产量提高到10g/L。